Drogas ácido hialurônico baratos

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Isto é os EUA Fase Nacional do PCT Internacional N ° PCT / GB97 / 02665, Internacional Data de instauração 29 de setembro, 1997, que é uma continuação em parte do pedido de patente para os mesmos US Ser. No. 08 / 722.909, apresentado em 27 de setembro, 1996, agora abandonado. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a composições farmacêuticas para administração de fármacos. Os lipossomas e ácido hialurónico têm sido utilizados como cada transportadores de drogas em sistemas de entrega de drogas tópicas. Para uma revisão de literatura sobre o uso de lipossomas como veículos de entrega de droga por via dérmica ver Gary P. Martin "Phospholipids como potenciadores de penetração na pele" University College do rei de Londres, Londres, Reino Unido, pp. 57-84, 1993. Os lipossomas são vesículas nas quais um compartimento aquoso ou volume é totalmente fechadas por uma membrana de moléculas de lípidos que são geralmente fosfolípidos. Os lipossomas podem ser formados espontaneamente quando os lípidos são dispersos em meio aquoso, produzindo uma população de vesículas de lipossomas com diâmetros máximos médias que variam de nanómetros a micrómetros. Os lipossomas podem ser formados de tal modo que eles vão aprisionar moléculas dentro de um ou ambos do compartimento aquoso e a membrana. Na verdade, os lipossomas podem ser formados a partir de constituintes naturais de tal modo que as suas formas de membrana ou membranas ou formar um bi-camada, a qual é similar ao arranjo lipídico de membranas celulares naturais. É possível que esta similaridade pode ser explorada em drug targeting ou de modulação imunitária, tanto in vitro como in vivo, em que a capacidade do lipossoma para imitar o comportamento de membranas naturais e, portanto, a ser degradados pelas mesmas vias, fazer lipossomas extremamente segura e eficaz veículo do fármaco para utilização médica. Para além dos constituintes químicos de lipossomas que determinam a sua fluidez, densidade de carga, e a permeabilidade, os lipossomas podem ser caracterizados por um tamanho e forma. Os lipossomas têm diâmetros máximos médias que variam de 25 nanometros maior do que a 1.000 nanómetros, que coincidem com os diâmetros médios máximos de células vivas. Como indicado acima, os lipossomas podem incluir uma única membrana bi-camada. No entanto, eles podem também incluir várias lamelas concêntricas de membrana em torno sucessivamente uns aos outros. É possível, por conseguinte, para os lipossomas grupo em uma das seguintes categorias com base no número de camadas de membranas e diâmetros relativos médios: vesículas multilamelares (MLV) lipossomas, vesículas pequenas (SUV) lipossomas unilamelares, vesículas unilamelares grandes (LUV) lipossomas e vesícula unilamelar de tamanho intermediário (IUV) lipossomas. Ver Novo, R. C, "Lipossomas-Uma Abordagem Prática", Oxford University Press, Oxford, pp. 1-33, 1990. Vários factores, tais como lamelaridade (isto é, o número de lamelas), composição de lípido, a carga sobre a superfície lipossomal, e a concentração total de lípidos foram provados para influenciar a deposição de fármaco nas camadas mais profundas da pele. Ver, por exemplo, Weiner et ai. "Entrega tópica de encapsulado em lipossomas Interferon em uma cobaia Modelo Herpes", Antimicrob. Agents Chemother. 33: 1217-1221, 1989. Houve também muita discussão sobre o mecanismo de difusão de lipossomas em pele. Originalmente, pensava-se que os lipossomas difundido intacta até a derme onde eles ficaram localizadas conforme estabelecido na Mezei, M. e Gulasekharam, V. "Lipossomas-um sistema de entrega de droga seletiva para a via de administração tópica," Life Sci. 26: 1473-1477, 1980. Mais tarde, esta teoria foi criticado por Ganesan et al. "Influência da droga liposomal Entrapment sobre a absorção percutânea", Int. J. Pharm. 20: 139-154, 1984; e Ho et al. "Mecanismo de entrega tópica de drogas em lipossomas", J. Controlled Rel. 2: 61-65, 1985, uma vez que se pensou que o estrato córneo densamente não iria permitir a passagem através de lipossomas para a epiderme e derme. Egbaria, K. e Weiner, N. "aplicação tópica de preparações de lipossomas", Cosmet. Banheiro. 106: 79-93, 1991, que postularam mistura molecular das bi-camadas do lipossoma e o estrato córneo tem lugar. Também tem havido indicações de que a via folicular contribui para a distribuição lipossomal de medicamentos para a pele, como discutido em Du Plessis et al. "Entrega tópica de encapsulado em lipossomas de interferão-gama," Antiviral Res. 18: 259-265, 1992; e evidência de que o tamanho do lipossoma é importante, tal como descrito em Du Plessis et al. "A Influência do tamanho das partículas de lipossomas na deposição de drogas na pele", 103: 277-282, 1994. Os lipossomas têm sido utilizados também para a entrega de drogas não tópica ou parentérica. Para avaliação da eficácia de entrega de drogas lipossomal, os investigadores determinaram (1) o efeito de componentes de fluidos biológicos para a integridade estrutural dos lipossomas e (2) as taxas a que os lipossomas são compensados ​​a partir do local de administração e distribuídas para os tecidos. Com ambos os parâmetros, o comportamento de lipossomas é ditada pelos seus atributos estruturais. Especificamente, como a estabilidade dos lipossomas aumenta a sua taxa de depuração a partir do local de administração diminui. Os seus tempos de circulação, no entanto, pode ser controlada pela utilização de lipossomas mais pequenos, alterando a sua composição lipídica dos lipossomas ou tornar hidrófila. Gregoriadis, G. "Lipossomas em Drug Delivery: presente e futuro", 346-352. Não obstante este amplo conhecimento e literatura, lipossomas sozinho às vezes são deficientes como veículos de distribuição de drogas, devido à sua instabilidade e / ou as suas características de penetração insatisfatórios em sistemas particulares. Como discutido e reivindicado na Publicação PCT N ° 93/16732, ácido hialurónico, também tem sido conhecida como um veículo para administração tópica de agentes farmacêuticos. O ácido hialurónico é extremamente hidrófilo, no entanto, e, portanto, não foi combinada com êxito com fármacos hidrófobos como a ciclosporina A. Descobriu-se que há muitas proteínas que se ligam a HA, incluindo vários receptores diferentes de células que têm uma variedade de funções, incluindo receptores relacionados com as células tumorais. Assim, tem sido sugerido que, com base na variedade de modos pelos quais HA podem interagir com as células que devem ter várias funções reguladoras. Muitos medicamentos, um exemplo de que é a ciclosporina A (fórmula molecular C 62 H 11 N 111 S 62; por vezes referido daqui por diante como CsA), são difíceis de administrar. A ciclosporina A é um undecapéptido cíclico antibiótico produzido pelo fungo Tolypocladium inflatum e é altamente lipofilico. A ciclosporina A também é praticamente insolúvel em água e hidrófobo, como indicado acima. A ciclosporina A é um linfócito T específico da célula imunossupressor potente que é usado principalmente para profilaxia e tratamento da rejeição de órgãos no transplante renal, hepática, cardíaca, transplante pancreático e. Também tem sido administrado por via oral ou por via intramuscular para o tratamento da psoríase, como discutido em Ellis et ai. "Ciclosporina Melhora psoríase em estudo Double Blind," JAMA, 256: 3110-3116; Griffiths et al. (1987) "Ciclosporina e Psoríase," Lancet, i: 806, 1986. Quando administrado por via oral, a ciclosporina A é geralmente administrado como uma solução de micro emulsão à base de óleo de oliva misturado com bebidas. A ciclosporina A também pode ser administrado como uma injecção intravenosa. O fármaco é solubilizado utilizando o agente solubilizante Chremophor EL, uma mistura de azeite e óleo de rícino polietoxilado (também conhecido pelo nome comercial de Neoral). A administração sistémica de tais ciclosporina A formulação, no entanto, conduz a diversos efeitos secundários, tais como reacções anafiláticas, síndrome da angústia respiratória do adulto, nefrotoxicidade, problemas gastrointestinais, a hepatotoxicidade, angioedema, e tremor leve como relatado em Thomson, AW "Immunobiology de ciclosporina A: Um Review, "Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 61: 147-172, 1983. Acredita-se que um número de estas reacções adversas são causadas pelo próprio veículo de droga, como discutido em Williams et ai. "Intravenosa Ciclosporina e Função Renal: A Johns Hopkins Experience," Transplante. Proc. 18: 66-73, 1986; e Lucas et al. "Efeitos da ciclosporina no rato isolado perfundido renal", Transplantation, 43: 795-799, 1987. A incidência de efeitos secundários sistémicos podem ser marcadamente reduzida pelo fornecimento de ciclosporina A por via tópica, embora os estudos anteriores relacionados com a administração transdérmica de ciclosporina A para o tratamento de psoriase usando emulsões óleo em água provaram este método de entrega a ser ineficaz. Ver, por exemplo, Gilhar et ai. "Topical ciclosporina na psoríase", J. Am. Acad. Dermatol. 18: 378-379, 1988; e Hermann et ai. "Ciclosporina tópica para psoríase," Skin Pharmacol. 1: 246-249, 1988. Além disso, os efeitos secundários podem ser reduzidos por meio de um transportador inferior antagónica. Assim, existe uma necessidade para uma forma de dosagem não-tóxico de ciclosporina A e uma via segura de administração. Uma combinação de CSA e lipossomas não é satisfatório por causa da instabilidade física da combinação. Ou seja, os lipossomas em combinação lipossoma / CsA pode quebrar fazendo com que o CsA para separar os lipossomas ou a CsA pode separar-se os lipossomas, mesmo onde os lipossomas não se quebram. Uma combinação adequada tinha ainda a ser desenvolvido. O ácido hialurónico, sozinho, falha também como um transportador para a CsA, devido à natureza lipofílica, hidrofóbico de CsA. HA e lipossomas, individualmente, não conseguem também boas para ser transportadores para outros fármacos que são lipofílico e hidrofóbico. SUMÁRIO DA INVENÇÃO Na sua forma mais geral, a presente invenção compreende uma mistura de lipossomas e ácido hialurónico (HA). A estabilidade de essencialmente qualquer lipossoma é reforçada por tal mistura e a penetrabilidade dérmica e drug targeting capacidade da mistura tipicamente excedem os de qualquer componente sozinho. Por estas razões, a mistura compreende um excelente veículo para fármacos topicamente e não topicamente aplicados. A presente invenção, portanto, também inclui combinações de tais misturas com agentes farmacêuticos com actividade na derme ou sub-derme e agentes farmacêuticos, que são geralmente administrados por via oral, parenteral ou intra-rectalmente. A presente invenção é particularmente eficaz para dérmicos composições terapêuticas em que o agente farmacêutico activo é incompatível com um veículo de entrega de outro modo desejável. Um tal agente farmacêutico é a ciclosporina A (daqui em diante, por vezes, a CsA). O encapsulamento de ciclosporina A dentro de lipossomas para formar um lipossoma / ciclosporina A composição, permite a ciclosporina A a ser combinados com ácido hialurónico (por vezes referido daqui em diante como HA) para formar uma composição farmacêutica eficaz, que é a forma de realização preferida da presente invenção. Uma composição farmacêutica tópica, compreendendo HA em combinação com lipossomas contendo CsA, é uma forma de realização preferida da presente invenção, como é um método terapêutico para o tratamento de um animal por administração tópica de uma parte interna ou externa do corpo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um tal composição farmacêutica. Ainda um outro aspecto da presente invenção é um método de fabrico de uma tal composição através da produção de lipossomas a partir de fosfolípidos, e mistura dos lipossomas com ácido hialurónico. O método inclui ainda encapsular uma substância farmaceuticamente activa, tais como ciclosporina A nos liposomas durante a produção de lipossomas. Outro aspecto da invenção é uma composição farmacêutica de HA e lipossomas contendo ciclosporina ou outros ingredientes activos administrados oralmente, parentericamente ou intra-rectalmente e métodos para o tratamento de um animal por via oral, parentérica ou intrarectalmente a administração de uma quantidade eficaz de uma tal composição farmacêutica. As composições farmacêuticas de acordo com a invenção pode também ser vantajosamente usado na chamada "terapia genética" para introduzir um polinucleótido seleccionado (por exemplo, um ADN ou ARN), a um alvo de células somáticas. As composições da invenção são mais vantajosamente adaptado para utilização em terapia génica por providenciar para o polinucleótido seleccionado (de um modo preferido sob a forma de um plasmídeo ou vector) para ser localizado dentro dos lipossomas. A invenção proporciona ainda de acordo com um outro aspecto, a utilização de ácido hialurónico no fabrico de uma composição farmacêutica para utilização em terapia génica. Em tal utilização, a composição farmacêutica pode, tal como indicado, incluir lipossomas, mas a utilização de ácido hialurónico em terapia genética de forma independente a partir da utilização de lipossomas também é englobada. O polinucleótido seleccionado pode, por exemplo, compreendem sequências que codificam a informação genética que está ausente a partir do gene alvo, ou estar presente, mas em forma defeituosa ou mutado. Assim, por exemplo, em certos estados de doença com uma base genética, tais como fibrose cística, um gene responsável por uma função fisiológica normal pode estar com defeito. Outro exemplo é o tratamento de doença de Gaucher, utilizando uma sequência de ADN que codifica a glucocerebrosidase. Usando a terapia genética, na ausência de um gene totalmente funcional pode ser pelo menos parcialmente corrigida pela administração de um agente terapêutico que compreende um polinucleótido seleccionado que inclui sequências associadas com a sequência do gene totalmente funcional. Estas sequências podem, em seguida, interage com as células alvo somáticas, por exemplo, tornar-se integrado no ácido nucleico da mesma, de modo que as células somáticas são transformados para um estado essencialmente normal. Outros exemplos incluem polinucleótidos associados com genes supressores de cancro, tais como, por exemplo, o gene supressor p53 cancro. Os polinucleótidos seleccionados para utilização em terapia de gene pode, vantajosamente, ser administrados numa forma que promova a interacção com um tecido alvo específico. Assim, por exemplo, no tratamento da fibrose cística é vantajoso para a composição a ser administrada numa forma que é adequada para administração aos pulmões, por exemplo, uma solução ou suspensão adequada para infusão para os pulmões. Do mesmo modo para o tratamento de doenças malignas localizadas, é vantajoso para as composições de acordo com a invenção a ser fornecida numa forma que promove a retenção no local de acção desejado. Por exemplo, no caso do tratamento de retinoblastoma por uma terapia genética que envolve a utilização de sequências de genes supressores de cancro, as composições de acordo com a invenção pode vantajosamente ser na forma de um implante ocular. Os polinucleótidos utilizados na terapia de genes pode, vantajosamente, incluir sequências que são adaptadas para promover a integração do ácido nucleico das células alvo, por exemplo, sequências que são homólogas com as sequências de genes alvo, de modo que a integração pode ocorrer como resultado de recombinação homóloga. Outros sistemas envolvem a incorporação do polinucleótido seleccionado num plasmídeo ou vector que é capaz de transfectar as células alvo. Exemplos incluem sistemas de vectores de adenovirus, em particular, os adenovírus que são deficientes, de modo que as características indesejáveis ​​dos vectores adenovirais nativas são eliminadas. Em particular, os adenovírus são de um modo preferido desactivada de modo a que a reprodução do mesmo é inibida ou suprimida. Os sistemas de expressão à base de plasmideo contendo um polinucleótido como descrito seleccionado podem incluir sequências de DNA que são adaptadas para controlar a expressão in vivo do polinucleótido seleccionado. Assim, por exemplo, uma região / potenciador do promotor podem ser incluídos, tais como as imediato de citomegalovirus de promotor de genes precoces-/ potenciador da transcrição e estabilizadores que promovam a estabilidade do mRNA transcrito. Para mais detalhes sobre esses mecanismos de controle, consulte "Cationic Lipid baseadas em genes de entrega sistemas: Farmacêuticas Perspectivas", Mahato, RI et al. Pharmaceutical Research, 14, N ° 7 (1998), pp.853-859 e as referências aí citadas. Outros exemplos de polinucleótidos que podem ser utilizados na terapia de genes incluem os chamados polinucleótidos "anti-sentido", que são adaptadas para interagir com o ácido nucleico associada com as células num estado de doença, a fim de inibir a duplicação, transcrição e / ou expressão do gene produtos associados com o estado de doença. Assim, por exemplo, os polinucleótidos anti-sentido podem ser concebidas para interagir com o ADN ou ARN virai e, portanto, inibem a replicação viral. Alternativamente, os polinucleótidos anti-sentido podem ser concebidos para interagir com os genes mutantes associados com estados de doença, tais como o cancro. Seleccionar um veículo apropriado para os polinucleótidos seleccionados utilizados em terapia genética é importante, porque o polinucleótido seleccionado pode muitas vezes ser uma molécula relativamente grande (1000-5000 kDa) que podem ser susceptíveis à degradação. Além disso, é frequentemente importante para o polinucleótido seleccionado para ser dirigido para um compartimento celular específico, por exemplo, o núcleo. Actualmente excipientes farmaceuticamente aceitáveis ​​disponíveis, muitas vezes carente de proporcionar as características desejadas de direccionamento do polinucleótido seleccionado para o núcleo e proteger o polinucleótido seleccionado de degradação. A utilização de uma combinação de ácido hialurónico e lipossomas, de acordo com a invenção pode, vantajosamente, utilizado para ultrapassar as dificuldades associadas com os métodos de terapia genética utilizadas até ao presente. Em tal utilização, o polinucleótido seleccionado (que pode compreender qualquer um dos exemplos acima referidos e que, vantajosamente, compreende um plasmídeo ou vector viral), pode ser localizado no lúmen do lipossoma, em que é protegido contra agentes, tais como nucleosidases celulares que pode causar degradação do mesmo. Tal como indicado, a presença de ácido hialurónico, em associação com lipossomas, resulta em características de estabilidade e de penetração melhoradas em comparação com os lipossomas por si só. BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS FIG. 1A é uma imagem fotográfica mostrando Fractura Congelada lipossomas carregados negativamente a 13000 × ampliação; FIG. 1B é uma imagem fotográfica Congelar Fracture mostrando lipossomas carregados negativamente em 9800 × ampliação; FIG. 2 é um gráfico que mostra a distribuição de tamanho de partícula dos lipossomas carregados negativamente em tampão HEPES com um pH de 7,4 e 0,1 M; FIG. 3 é um gráfico que mostra um indicador de elasticidade medida pelo módulo de armazenamento (G ') e um indicador de viscosidade como medida pelo módulo de perda (G ") para o ácido hialurónico, com e sem lipossomas carregados negativamente em função da frequência; FIG. 4 é uma curva que mostra a relação entre a área de pico em função da concentração utilizando fluoranteno como um padrão interno temporário, que curva foi utilizada para calibrar a cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) unidade utilizada para determinar a quantidade de Ciclosporina A encapsulada em lipossomas; FIG. 5A é um congelamento fratura imagem fotográfica mostrando a ciclosporina A contido em lipossomas carregados negativamente em 4300 × ampliação; FIG. 5B é um congelamento fratura imagem fotográfica mostrando a ciclosporina A contido em lipossomas carregados negativamente a 18.000 × ampliação; FIG. 6 é um gráfico que mostra um indicador de elasticidade medida pelo módulo de armazenamento (G ') e um indicador de viscosidade como medida pelo módulo de perda (G ") para HA, com e sem lipossomas com carga negativa contendo ciclosporina A em função da frequência; FIG. 7 é um gráfico que mostra um indicador de elasticidade medida pelo módulo de armazenamento (G ') em função da frequência para o carregado negativamente, positivamente carregada, e lipossomas neutros suspenso em ácido hialurónico, ácido hialurónico e só no momento é igual a zero horas; FIG. 8 é um gráfico que mostra um indicador de elasticidade medida pelo módulo de armazenamento (G ') em função da frequência para o carregado negativamente, positivamente carregada, e lipossomas neutros suspenso em ácido hialurónico após 72 horas; FIG. 9 é um gráfico que mostra a oxidação comparativa das formulações contendo os lipossomas por si só, os lipossomas com HA, e lipossomas com acetato de α-tocoferol; FIG. 10 é um congelamento fratura imagem fotográfica mostrando a ciclosporina A contido em lipossomas e HA antes da liofilização em 8650 × ampliação; FIG. 11 é um congelamento fratura imagem fotográfica mostrando a ciclosporina A contido em lipossomas e HA antes da liofilização a 14.400 × ampliação; FIG. 12 é um congelamento fratura imagem fotográfica mostrando a ciclosporina A contido em lipossomas e HA após liofilização a 15.350 × ampliação; FIG. 13 é um congelamento fratura imagem fotográfica mostrando a ciclosporina A contido em lipossomas e HA após liofilização em 9230 × ampliação; e FIG. 14 é um gráfico que mostra a presença radioactivos comparativa de ciclosporina A na epiderme e derme da pele em formulações contendo HA e lipossomas e lipossomas apenas. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Tal como aqui geralmente utilizado, refere-se a HA um composto de ácido hialurónico que sobre os rendimentos de dissolução de ácido hialurónico. As composições farmacêuticas eficazes da presente invenção compreendem uma mistura de lipossomas com uma quantidade suficiente de HA para funcionar como um transportador de droga eficaz para os lipossomas (e qualquer droga nela contida), com o qual o HA é misturado. A quantidade de HA necessária para esse efeito é dependente da fracção de peso molecular do HA. Por exemplo, quando o seu peso molecular é relativamente baixa, a concentração pode ser relativamente elevado, e vice-versa. HA pode ter um peso molecular médio na gama de 10.000 a 1.000.000 daltons, preferivelmente a maior fracção sendo de 400.000 a 800.000 daltons. O ácido hialurónico é normalmente fornecido sob a forma de soluções aquosas de sais de HA, tais como hialuronato de sódio ou de potássio, com uma concentração de AH na gama de 0,3 a 2,5% em peso. As composições que possuem HA dentro destas gamas de concentrações e pesos moleculares médios será geralmente eficaz como um agentes de transporte tópico ou não tópica de drogas para uma vasta gama de lipossomas. Como discutido abaixo, os lipossomas são geralmente preparados utilizando duas técnicas, uma técnica ciclo de congelação descongelar e uma técnica convencional de filme. Ambas as técnicas produzem predominantemente vesícula multilamelar (MLV) de lipossomas (MLV incluem, tipicamente, cinco ou mais lamelas concêntricas e têm diâmetros médios máximos na gama de 100 a 1000 nanómetros). Podem também ser utilizadas outras técnicas de preparação de lipossomas. Independentemente do método pelo qual tais lipossomas são preparados, podem ser tornadas mais estáveis ​​e mais útil pela combinação, numa mistura simples, com HA. Além disso, os lipossomas não parecem afectar a natureza viscoelástica do HA. Com efeito, a força do gel HA é aparentemente aumentada. Uma possível explicação é que os lipossomas promover a ligação hidrofóbica. É também possível que o AH ajuda a estabilizar e proteger os lipossomas de desagregação, superando, assim, um problema típico associado com a administração de lipossomas. Tem sido demonstrado que é possível formar uma composição farmacêutica gelatinoso, incluindo ciclosporina A e de ácido hialurónico utilizando lipossomas. Ao misturar HA com um lipossoma / ciclosporina A composição de modo a formar uma mistura dos mesmos, a ciclosporina A pode ser eficazmente orientada para e depositado nos epiderme, derme, e sub-derme e junções entre as mesmas, com a entrega sistémica mínima. Além disso, a composição de HA-lipossoma contendo ciclosporina A ou de outros ingredientes activos podem atingir locais particulares no corpo, quando entregues por via oral, parenteral ou intra-rectalmente. Isto é atribuído à capacidade de segmentação de ambos os componentes. Especificamente, as interacções de receptores de HA com células diferentes torná-lo um candidato adequado para uma quimioterapia dirigida, veículo para administração não tópica de um medicamento. O presente invento é também dirigido a um método para o tratamento de uma condição susceptível de tratamento por um agente farmacêutico que possa ser disposto numa região dérmica pela aplicação tópica do agente sobre a superfície da região de dérmica numa composição veículo compreendendo uma mistura de lipossomas e HA. Os peritos na arte podem facilmente determinar as quantidades relativas de agente, lipossoma, e HA mais adequada num determinado caso, mas, em qualquer caso, o transportador de HA deve estar em concentração suficiente para fazer com que entrega substancial de um não-tóxica e terapeuticamente eficaz quantidade do agente farmacêutico a uma região da derme susceptíveis de tratamento. Para orientação, pode-se referir, por exemplo, a publicação do Tratado de Cooperação de Patentes N ° WO 93/16732 (Falk et ai .; publicada 02 de setembro de 1993) que descreve os níveis de dosagem de combinações de HA e agentes medicinais ou terapêuticos em detalhe. Originalmente, pensou-se que os lipossomas podem funcionar como intensificadores de penetração. Ou seja, pensava-se que os lipossomas podem facilitar a penetração do tecido para permitir a entrega de uma droga. No entanto, é agora acreditava-se que os lipossomas podem ter um mecanismo semelhante ao proposto para o ácido hialurónico. Isto é, os lipossomas podem melhorar a entrega localizada de fármaco dentro da epiderme e / ou a derme e, desse modo, reduzir a quantidade de droga libertada para a circulação sistémica. Tal efeito é de uma vantagem óbvia se o local de entrega desejado encontra-se no interior das camadas de pele. Além disso, a entrega localizada pode ser benéfico para medicamentos que devem ser aplicadas durante um período prolongado de tempo, sobre extensas áreas do corpo, ou em que a toxicidade sistémica pode ser um problema. Tal entrega localizada de agentes farmacêuticos ou outros xenobióticos seria desejável, por exemplo, para a utilização tópica de corticosteróides; agentes citotóxicos; anestésicos; retinóides; hormonas sexuais; antifúngicos, agentes antibacterianos e antivirais para o tratamento de uma variedade de desordens da pele; agentes imunossupressores, e anti-proliferativos. Para mostrar que, essencialmente, qualquer lipossoma pode ser combinado com HA sem reduzir a eficácia do HA, como um veículo de transporte e entrega, o efeito de carga negativa, carregado positivamente, e lipossomas neutros nas propriedades viscoelásticas de um gel de HA foram estudados na ausência de qualquer droga. As propriedades viscoelásticas foram estudados através da observação do módulo de armazenamento (G ') e módulo de perda (G ") dos lipossomas e a composição de gel de HA, onde o HA é de 2,5%, em peso, da composição em várias frequências e em tensão constante ou deslocamento. Módulo de armazenamento (G ') é um indicador da elasticidade de uma substância e, portanto, é uma indicação da força da composição de gel HA e um medidor de a estabilidade da estrutura de gel tridimensional. A estabilidade da estrutura tridimensional se refere à capacidade da composição de gel HA para manter uma forma tridimensional. Quanto maior for o valor de G ', a uma dada frequência mais elástica da composição de gel HA e, portanto, maior resistência a composição de gel HA possui. Módulo de perda (G ") é um indicador de que a viscosidade de uma substância. Quanto maior for o valor de G "a uma dada frequência, mais viscosa da composição de gel HA. A frequência à qual o módulo de armazenamento (G ') atravessa o módulo de perda (G ") é conhecida como a frequência de cruzamento. Uma vez que o módulo de perda (G ") é um indicador de que a viscosidade de uma substância e o módulo de armazenamento (G ') é um indicador da elasticidade de uma substância, a frequência de cruzamento fornece um modo de determinação das propriedades viscoelásticas de um substância. Por exemplo, se a substância em estudo é um gel, menor é a frequência de cruzamento, a mais viscoelástica do gel. Um material viscoelástico é um material viscoso que também apresenta certas propriedades elásticas, tais como a capacidade de armazenar a energia de deformação. No contexto dos géis, o mais viscoelástica um gel, o mais estável do gel. A estabilidade das formulações de lipossomas foi determinada através do estudo dos perfis reológicos de várias composições de gel de HA / lipossoma e comparando esses perfis no tempo igual a zero e depois de setenta e duas (72) horas. Os testes foram prorrogado para além do período de 72 horas e os resultados apareceram consistente durante 7 dias. Outros testes indicaram estabilidade comparável por até 30 dias. As características das composições do presente invento são demonstradas nos testes seguintes, procedimentos e resultados. Fosfatidilcolina (lecitina; Grau 1, possuindo uma pureza superior a 99%) e fosfatidil-serina e glicerol (com uma pureza superior a 99%) foram obtidos a partir de produtos lipídicos (Redhill, Surrey, Reino Unido.). Colesterol, tampão HEPES 0,05 molar (um tampão zwitteriónico) tendo um pH de 7,4, e estearilamina (cromatografia em fase gasosa 98%) foram adquiridos da Sigma Chemical Co. (Poole, Dorset, Reino Unido.). Todos os solventes eram de cromatografia (HPLC) de grau líquida de alto desempenho e foram fornecidos pela Fisher Scientific (Loughborough, Leics, UK.). Ácido hialurónico de sódio (produto n. HG4003 e HG4001) com pesos moleculares médios na gama de 10.000 a 1.000.000 daltons foi fornecida por Hyal Pharmaceutical Corporation. Estados Unidos grau farmacêutico ciclosporina A foi obtido a partir do Atlântico Chemical Co. (Ontario, Canadá). Produção de lipossomas, Drug Carregando técnicas, e adição de HA Foram utilizadas duas técnicas para a produção de lipossomas. Ambas as técnicas produzidos lipossomas MLV que permitiram a incorporação da quantidade máxima de um fármaco para os lipossomas. As duas técnicas foram realizadas uma técnica de congelamento Thaw Ciclo concebido por Mayer et al. "Solute Distribuições e Interceptação Eficiências Observado em Freeze-Thawed Multilameller vesículas," Biochim. Biophys. Acta, 817:. 193-196, 1985, ea técnica muito mais simples convencional Film descrito por Novo "Lipossomas-Uma Abordagem Prática", Oxford University Press, Oxford, pp 1-33, 1990. A técnica convencional de Cinema tem menos etapas de produção que a técnica de congelamento Thaw Ciclo. Em ambas as técnicas, a ciclosporina A foi encapsulada em lipossomas no ponto de produção de lipossomas Usando a técnica convencional de filme, a ciclosporina A foi primeiro adicionado a lípidos que compreendem fosfatidilcolina (PC), colesterol (C), e phosphotidyl bovina serina (PS) ou glicerol phosphotidyl (PG) numa proporção molar de 1.0 PC: 0,5 C: 0,1 PG ou PS. Podem também ser utilizados outros lípidos e proporções molares. Os lípidos e ciclosporina A foram, em seguida, dissolvido em uma proporção de 2 para 1 de clorofórmio e metanol num balão de fundo redondo. Os solventes foram então removidos por evaporação rotativa sob uma corrente de azoto gasoso, seguido por secagem do lípido e a ciclosporina A combinação sob vácuo durante a noite para formar um lípido e CsA filme. O lípido e a CsA película foi então hidratado com tampão HEPES (0,05 M, pH 7,4), formando assim lipossomas e CsA ter nele encapsulada. A composição de lipossomas composta CSA / 10% em peso phosphotidyl de colina, 2,5% em peso de colesterol, 1,0%, em peso, serina phosphotidyl ou glicerol, e 1,35% em peso de CsA. Pura, pó de ácido hialurónico de sódio seco (Produto No. HG4003) foi então adicionado à combinação de CsA / lipossoma de modo a que a concentração de HA foi de 2,5% em peso. A adição de HA à concentração de CsA / lipossoma reduziu as concentrações finais dos lipossomas a 13,165% (9,75% em peso phosphotidyl de colina, 2,44% em colesterol peso, 0,975% em peso phosphotidyl serina ou glicerol) e da CsA para 1,32% por peso da composição. Por exemplo, uma película que compreende 1,0 g de colina phosphotidyl, 0,25 gramas de colesterol, 0,10 gramas phosphotidyl serina ou glicerol, e 0,135 gramas de CsA foi hidratada com 8.515 gramas tampão HEPES para se obter 10 gramas de lipossomas com 0,135 gramas de CsA neles encapsuladas, ou 13,5 miligramas de CsA FIG. FIG. FIG. FIG. 3. FIG. Detalhes do produto Efeitos colaterais: = Preços realmente incrível = = Sem receita médica! = = Top Medicamentos de alta qualidade! = = Bônus de desconto = = Rápido e discreto Entrega = = 24/7 Suporte ao Cliente. Consulta livre = ENTRE AQUI! Do rótulo do fabricante: O ácido hialurónico é um componente importante do tecido articular. Orgulho de Puritan ♦ fornece esses artigos para apenas informações. 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